Что такое вкр в медицине
Вирус папилломы человека
ВПЧ – обширная группа вирусов, насчитывающая более 100 типов, длительное время находящееся в организме человека, передаваемая как половым, так и контактно-бытовым путем (контактно-бытовой путь относится только к кожным типам).
В зависимости от места их обитания в организме человека делятся на кожные типы (растут на коже – плоские, обычные, подошвенные бородавки) и слизистые (аногенитальные), проявляющие себя как в генитальной, так и в анальной области.
Именно слизистые типы вызывают основные беспокойства у людей. Их также делят на две разные группы в зависимости от способности изменять поверхностный эпителий:
Клинические особенности ВПЧ
Таким образом, резюмируя все вышесказанное, еще раз хочется повторить, что простое выявление вируса папилломы человека низкого или высокого канцерогенного риска без клинических проявлений (остроконечных кондилом, дисплазий шейки матки высокой степени, рака шейки матки) не требует никаких лечебных мероприятий (приема таблеток с противовирусной и иммуностимулирующей активностью), так как их эффективность не превышает эффекта плацебо. Лишь наличие генитальных бородавок, вызванных ВПЧ низкого канцерогенного риска, требует их деструктивного удаления. Также хирургическое лечение проводится только при наличии предраковых состояний (CIN 3) и рака шейки матки, вызванных вирусом папилломы человека высокого канцерогенного риска. Обследование на ВПЧ и лечение мужчин грамотными урологами в практической медицине не проводится.
Вирус папилломы человека ВПЧ и рак шейки матки
Передаются вирусы папилломы человека при половых контактах. С началом половой жизни этим вирусом заражается подавляющее большинство женщин. Следует учитывать, что риск заражения ВПЧ зависит и от количества половых партнёров и от сексуального поведения единственного партнёра (распространенность ВПЧ у мужчин примерно равна распространенности среди женщин).
80% инфицированных женщин вирус уходит из организма самостоятельно, без какого-либо лечения, не вызывая болезней (спонтанная элиминация). И только у небольшого процента женщин с хронической (персистентной) инфекцией, обусловленной высокоонкогенными генотипами ВПЧ, через 10-20 лет может развиться рак шейки матки. Кажется, времени для успешной диагностики и лечения вполне достаточно, но расслабляться не стоит.
Папилломавирусная инфекция очень коварна, и связанные с нею предраковые изменения, как правило, не только не вызывают никакого беспокойства и дискомфорта, но часто и не обнаруживаются при обычном гинекологическом осмотре.
При этом нужно учитывать, что выявление ВПЧ группы высокого канцерогенного риска у женщин не является основанием для постановки диагноза злокачественной опухоли, но служит поводом к дальнейшему обследованию, более интенсивному наблюдению и, при необходимости, лечению предраковых изменений слизистой шейки матки.
Исход ВПЧ-инфекции зависит от генотипа вируса. Все папилломавирусы подразделяются на группы по «вредности» или «онкогенности». ВПЧ-тесты методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяют выявить все распространённые и клинически значимые генотипы ВПЧ.
К группе низкого канцерогенного риска относятся 6, 11 генотипы ВПЧ: они могут быть причиной остроконечных кондилом и дисплазий легкой степени. Анализ на ВПЧ 6 и 11 генотипов применяется для дифференциальной диагностики с заболеваниями не папилломавирусной этиологии и при обследовании беременных для оценки риска развития папилломатоза гортани у новорожденных.
К раку шейки матки чаще всех приводят 16 и 18 генотипы папилломавирусов. Они, вместе с 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68 типами входят в группу высокого канцерогенного риска. При проведении анализов на вирус папилломы человека именно на эти генотипы нужно обращать особое внимание. Наиболее важен анализ ДНК ВПЧ 16 типа и 18 типа, особенно, если их концентрация («вирусная нагрузка») высока. А онкогенный потенциал 51 и 56 типов не так велик, поэтому они менее опасны, даже если в анализе на ВПЧ присутствуют в относительно большом количестве.
Все дополнительные анализы на вирус папилломы человека и другие исследования должны проводиться по назначению и под контролем врача.
Если поражение слизистой шейки матки выявлено на ранней стадии, предшествующей раку, то лечение более эффективно и практически не имеет побочных эффектов. Если не обнаружено никаких патологических изменений слизистой шейки матки, то и необходимости в лечении нет: вероятнее всего, организм справится с вирусом самостоятельно.
Однако через 1 год необходимо пройти повторное ВПЧ-тестирование и, если вирус все еще присутствует, снова обследоваться у врача-гинеколога.
Анализ на вирус папилломы человека (ВПЧ) методом ПЦР и цитологические исследования.
Основой современных скрининговых программ раннего выявления онкологической патологии шейки матки является цитологическое исследование по Папаниколау (ПАП-тест, окраска по Папаниколау). К сожалению, далеко не во всех российских медицинских учреждениях используется эта методика, очень часто применяются другие, менее совершенные способы приготовления (окраски) цитологического мазка.
Именно поэтому для традиционного цитологического скрининга характерно большое количество ложноотрицательных и неопределенных результатов, требующих повторных исследований.
Инфекция, вызываемая вирусом папилломы человека
ВПЧ – группа распространенных и генетически разнообразных вирусов, инфицирующих и поражающих эпителий кожных покровов (кожные типы ВПЧ) и слизистых оболочек ротовой полости и аногенитальной области (генитальные типы ВПЧ). Генитальные типы ВПЧ передаются преимущественно половым путем и через родовые пути от матери ребенку. Основными клиническими формами папилломавирусной инфекции гениталий являются остроконечные кондиломы, а также злокачественные формы изменения эпителиальных клеток, приводящие к раку шейки матки.
Исход инфекции зависит от типа вируса. Типы ВПЧ низкого канцерогенного риска (НКР, низкоонкогенные) связаны с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени. Типы ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР, высокоонкогенные) – 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 – наряду с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени, также индуцируют злокачественную трансформацию эпителия, приводящую к инвазивному раку.
Дифференциальная диагностика. Поражения шейки матки, влагалища, вульвы, пениса, заднего прохода непапилломавирусной этиологии; в случае остроконечных кондилом – с проявлениями, связанными с вирусом простого герпеса, а также с истинными папилломами.
Лабораторная диагностика папилломавирусной инфекции включает выявление и количественное определение ДНК ВПЧ ВКР, генотипирование ВПЧ ВКР, выявление ДНК ВПЧ НКР.
Материал для исследования
Выявление и определение концентрации вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска
Показания к обследованию
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления ДНК ВПЧ ВКР используют МАНК (ПЦР, NASBA, TMA и др.) и методы амплификации сигнала (гибридный захват). Культивировать вирус не удается.
Гибридный захват является первым и наиболее охарактеризованным методом выявления ДНК ВПЧ. Применение метода позволяет определять концентрацию вируса в условных единицах оптической плотности, линейный диапазон небольшой (3–4 порядка). Образцы, в которых присутствует вирус в концентрации ниже порога клинической значимости, учитываются как отрицательные. Граница клинической значимости определяется путем тестирования эталонного образца (концентрация ДНК ВПЧ 1 пг/мл). Все сигналы, значения которых ниже эталонного, считаются отрицательными. Более современными, быстрыми и удобными для использования являются методы на основе АНК. МАНК, работающие в неколичественном формате, выявляют либо ДНК вируса (ПЦР, HDA и др.), либо мРНК транскрипты онкогенов E6 и E7 ВПЧ (NASBA, TMA). Для выявления только клинически значимых концентраций (по разным методикам учета – более 1 пг/мл или 1000 копий ДНК вируса на 100000 клеток человека) используют методики с чувствительностью, при которой образцы с низкой концентрацией учитываются как отрицательные. Наиболее целесообразно использовать ПЦР в реальном времени, которая позволяет точно определить концентрацию ДНК вируса. На основе полученных данных проводится не только оценка концентрации вируса, но, что важно, проводится градация результата по клинической значимости полученной концентрации на:
Различные наборы реагентов могут отличаться спектром выявляемых генотипов. К группе ВПЧ ВКР относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 генотипы. Наиболее канцерогенными считаются 16 и 18 типы, наименее – 51, 56, 68. Для РФ и стран СНГ клинический смысл исследования сохраняется только при определении как минимум 10 генотипов из перечисленных выше. Выявление в смеси генотипов низкого или неустановленного риска существенно снижает специфичность выделения группы риска онкологической патологии и не может быть оправдано.
Показания к применению различных лабораторных исследований. Для проведения скринингового обследования на наличие предрака и рака шейки матки предпочтительным является использование мазков/соскобов эпителия цервикального канала и зоны трансформации, выполненных цервикальными цитологическими щеточками. Допускается использование для этих целей мазков из влагалища. Для скрининга рака шейки матки все тесты, вне зависимости от выбранной технологии, должны иметь сбалансированные аналитические и диагностические характеристики, удовлетворяющие следующим условиям – не менее 98% чувствительность по отношению к CIN2+ и не менее 90% специфичность относительно широко валидированного в скрининге теста (например, Hybrid Capture II). Для достижения оптимума аналитической чувствительности избирают подход отсечения образцов с концентрацией ДНК ВПЧ ниже порога клинической значимости. Для этого либо проводят искусственное снижение аналитической чувствительности, либо выбирают в качестве референтного контрольный образец с требуемой пороговой концентрацией. Предпочтительным является измерение концентрации ДНК ВПЧ методом ПЦР в реальном времени.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Обнаружение ДНК ВПЧ в любой концентрации свидетельствует о наличии возбудителя, однако при интерпретации результатов тестирования следует учитывать, что более 80% инфицированных спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Опасность представляет персистентная форма инфекции (сохраняющаяся более 12–24 мес.). Однократный положительный результат надежно указывает на принадлежность к группе риска развития рака шейки матки в случае, если исследование проводится в группе женщин старше 30 лет или вступивших в половую жизнь более 6–7 лет назад. Особая настороженность должна быть проявлена в отношении пациенток, у которых подтверждается персистенция вируса при повторном тестировании через 1 год. При скрининге с использованием количественных тестов принимают во внимание только клинически значимый результат. Для дифференциальной диагностики и наблюдения пациентов после проведения лечения дополнительная ценность одиночного количественного определения не показана. Перспективным в прогнозе риска рецидива CIN2+ является оценка динамики вирусной нагрузки после лечения (снижение или увеличение концентрации вируса).
Генотипирование вирусов папилломы человека. Цель генотипирования ВПЧ – отличие персистирующей инфекции от случая повторного инфицирования (сохранение генотипа в повторных тестах); уточнение тактики ведения больных в зависимости от онкогенности выявленных типов вируса.
Показания к обследованию. Пациенты с выявленной папилломавирусной инфекцией ВКР
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для генотипирования ВПЧ используют МАНК. Распространение получили методики с детекцией продуктов амплификации методом электрофореза (генотипирование по величине амплифицируемого фрагмента), гибридизации на плашках и стрип-полосках, ПЦР в реальном времени.
Классические методики, использующие принцип гибридизации со специфическими зондами позволяют определять наиболее широкий спектр генотипов (20–40). Однако использование для амплификации универсальных праймеров приводит к существенным различиям в аналитической чувствительности выявления различных генотипов ВПЧ, приводя к заметным искажениям результатов. Кроме того, широкий спектр определяемых генотипов необходим только для научных исследований. В клинической практике достаточным может считаться генотипирование ВПЧ ВКР (10–13 типов). Методики, основанные на применении типоспецифических олигонуклеотидов, позволяют проводить типирование спектра клинически значимых генотипов и в заметной степени лишены проблемы различий аналитической чувствительности по отношению к разным генотипам ВПЧ. Предпочтение должно отдаваться мультиплекс-методикам с использованием ПЦР в реальном времени как наиболее быстрым, контаминационно безопасным, предполагающим возможность автоматизации. Может проводиться сокращенное генотипирование с выявлением только наиболее онкогенных типов ВПЧ 16 и 18.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для установления персистенции вируса применяют подход повторного генотипирования через 12 месяцев. Персистенция подтверждается при сохранении генотипа/ генотипов при повторном исследовании, полная смена спектра генотипов указывает на излечение и повторное инфицирование альтернативными ВПЧ. Выявление наиболее онкогенных типов ВПЧ (16 и 18) может указывать на потребность в более агрессивной тактике ведения больных (более частые повторные визиты, более тщательное обследование для выявления предраковых изменений и др.).
Выявление вирусов папилломы человека низкого канцерогенного риска
Показания к обследованию
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для выявления ДНК ВПЧ НКР используют МАНК (ПЦР, NASBA, TMA и др.) и методы амплификации сигнала (гибридный захват). Предпочтение должно отдаваться быстрым и контаминационно-безопасным методикам, таким как ПЦР в реальном времени.
Клинически оправданным является определение двух генотипов 6 и 11 (более 90% случаев папилломатоза гортани у детей). Некоторую дополнительную ценность имеет выявление 42, 43 и 44 генотипов. Количественное определение не оправдано.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Выявление 6 и/или 11 генотипов указывает на возможный риск развития папилломатоза гортани у ребенка (риск повышается, если вирус обнаружен в гортани). При планировании беременности может быть рекомендована выжидательная тактика. При сопутствующем наличии остроконечных кондилом – их лечение методом химической и/или физической деструкции. При наличии беременности ее прерывание или родоразрешение методом кесарева сечения не оправданы, так как риск развития папилломатоза гортани ниже риска возможных осложнений указанных операций.
Что такое вирус папилломы человека и как его лечить
Вирус папилломы человека (ВПЧ) воздействуют на эпителиальные клетки и имеют диаметр частиц 55 нм. Особенностью является пролиферация эпителия кожи, а также слизистых оболочек. На начальной стадии возбудитель обычно поражает базальные клетки эпителия, проникая в них через микротравмы. Локализованные папилломы обычно встречаются на коже шеи, в подмышечных впадинах, в паху и на половых органах (чаще всего), слизистой оболочке рта и в носоглотке.
Этот вирус может существовать на протяжении многих лет бессимптомно. Для обнаружения ВПЧ используют электронно-микроскопические или молекулярные гибридизированные методы.
Типы вируса папилломы человека
У людей различают ВПЧ, который поражает слизистые оболочки и кожный покров. Среди большого количества папилломавирусов выделяют виды с низким и высоким онкогенным риском. Доказано, что онкогенные свойства связаны со способностью интегрировать ДНК в геном клеток человека.
Активируется вирус в 10-20% случаев. В зависимости от его типа, это может привести к доброкачественным или злокачественным поражениям. Некоторые ВПЧ не онкогенны. Они приводят к появлению бородавок и остроконечных кондилом. Наиболее распространенными являются ВПЧ 6 и 11.
Онкогены ВПЧ – это те, у которых высокий риск развития раковых поражений, особенно на шейке матки или анусе. Что касается кожного покрова, чаще встречается ВПЧ 16 и 18, а также 5 и 8, которые могут привести к раку кожи. Наиболее известной формой рака, вызванной ВПЧ, является рак шейки матки. Но мужчины также могут заразиться вирусом папилломы, который в худших случаях вызывает рак пениса или анального отверстия.
Часто женщины сталкиваются с ВПЧ 16 – это форма, при которой наблюдается интросомальное паразитирование, т. е. вне клеточной хромосомы (доброкачественное). ВПЧ 18 отличается высоким риском развития онкологии – сначала образуются доброкачественные опухоли, которые спустя некоторое время перерождаются в рак. Вирионы в данном случае имеют крохотные размеры (до 30 нм).
Особенности заражения
Вирус папилломы человека очень заразен. Он обычно передается через прямой контакт, кожа к коже или слизистая оболочка к слизистой оболочке, с инфицированным человеком. При генитальной инфекции это чаще всего происходит во время вагинального или орального сексуального контакта. Большое количество половых партнеров или других ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) повышают риск. Косвенная передача через предметы, загрязненную одежду или постельное белье также возможна, но происходит довольно редко.
В 7% случаев передача вируса от матери к ребенку может произойти во время родов, когда инфекция активна. Риск увеличивается до 40% в случае заражения ВПЧ 16 или 18.
Проникая в эпителий, нарушая целостность, папилломавирусная инфекция способствует росту нижнего слоя эпителиальных клеток в виде кондилом или бородавок. Такая форма болезни заразна и быстро передается другим. Как правило, бородавки и кондиломы не вызывают метастазов и часто спонтанно исчезают.
Симптомы ВПЧ
Инкубационный период длится до 9 месяцев (в среднем 3 месяца). ВПЧ может присутствовать в организме без очевидных симптомов. Вирус может оставаться незамеченным в течение нескольких месяцев или нескольких лет. Даже на этом этапе он является заразным.
Кожные бородавки обычно встречаются группами и при расчесывании их количество увеличивается. У двух наиболее распространенных форм папилломы либо сероватые, твердые, возвышенные с пересеченной поверхностью (обычная бородавка), либо плоские и красноватые (плоская бородавка). Колючие бородавки встречаются на подошвах стоп или на пятках, растут внутрь и поэтому часто болезненны.
Также возможно заражение слизистых оболочек в верхних дыхательных путях. Может быть поражена конъюнктива глаз, что приводит к розовым стеблевым наростам.
Труднее обнаружить бессимптомное течение, которое врач может увидеть только с помощью вспомогательных средств, таких как уксусная кислота (вызывает обесцвечивание бородавок) или микроскоп.
Кроме того, вирус также может поселиться в клетках без каких-либо изменений тканей. Тогда говорят о скрытой инфекции, то есть наличии возбудителей, но без симптомов. После инфицирования эта фаза может длиться от нескольких недель до нескольких месяцев.
Возможные последствия
При заражении вирусы проникают в клетки покровной ткани кожи и слизистой оболочки, оседают в ядрах клеточных структур и размножаются там. Обычно такие ВПЧ-инфекции остаются незамеченными и заживают сами по себе без последствий, т. к. иммунная система успешно борется с возбудителем.
Однако некоторые из типов ВПЧ создают изменения кожи, т. е. наросты. Возможные формы включают генитальные бородавки или кондиломы и папилломы, которые могут поражать, например, лицо, руки или ноги.
Постановка диагноза
Тест на ВПЧ-инфекцию проводится у женщин в рамках профилактических визитов к гинекологу. При гинекологическом осмотре мазок берется из слизистой оболочки шейки матки, это называется тестом Папаниколау (цитологическое исследование). Полученный материал изучается на предмет изменений тканей для определения предраковых состояний.
Кроме того, может быть проведен тест на ВПЧ, в котором клеточный материал из мазка слизистой оболочки или образца ткани тестируется в лаборатории на наличие определенных вирусов. Однако это позволяет доказать только инфицирование пораженного участка, но не сделать никаких заявлений о том, произошли ли изменения тканей. Таким образом, тест на ВПЧ имеет смысл, особенно в сочетании с тестом на Папаниколау, и может помочь обнаружить предшественники рака на ранней стадии.
Если тест положительный, это еще не причина для беспокойства, поскольку инфекция не всегда приводят к раку. Рекомендуется регулярное обследование, чтобы обнаружить изменения тканей на ранней стадии. И наоборот, отрицательный результат теста не позволяет утверждать, существовала ли в прошлом инфекция, с которой успешно боролся организм.
Для мужчин нет профилактического обследования, в рамках которого тест проводился бы регулярно. Если существует соответствующее онкологическое заболевание, исследование опухоли может определить, лежит ли ВПЧ-инфекция в основе рака.
Специализированные методы ДНК также используются в лабораторной диагностике, например ПЦР в режиме «реального времени». Аногенитальные бородавки, вызванные ВПЧ 6 и 11 типа, легко выявляются при проведении гинекологического осмотра.
Как вылечить вирус папилломы человека
В большинстве случаев заболевание не требует лечения, потому что оно проходит само по себе, а затем вирусы больше не обнаруживаются. Однако, если это не так, инфекция может длиться дольше и сохраняться в течение нескольких месяцев или лет.
На сегодняшний день не существует методов системного воздействия на этот вирус, за счет которых можно было бы полностью его уничтожить. Тем не менее, лечение образовавшихся бородавок уменьшает количество вирусов, поэтому во многих случаях иммунная система может бороться с остальными вирусами и таким образом избавляться от них. В некоторых случаях возбудители выживают и могут вызывать симптомы заболевания снова и снова.
В случае рака, вызванного ВПЧ, лечение значительно сложнее. При раке шейки матки часто целесообразно удаление матки, соответственно верхней части влагалища и яичников. Это можно дополнить лучевой терапией, чтобы исключить вероятность рецидивов. Другие раковые заболевания, вызванные ВПЧ, чаще всего лечатся целенаправленной терапией, такой как лучевая или химиотерапия.
Следует помнить, что операция не является кардинальным решением, а только решает косметическую проблему, т. к. после удаления вирус способен оставаться в окружающих тканях и кондиломы могут появляться снова.
Профилактика заражения
Существует две прививки: двухвалентная вакцина против ВПЧ 16 и 18 и четырехвалентная против ВПЧ 6, 11, 16 и 18. Вакцинация рекомендуется для всех молодых девочек в возрасте от 14 лет и старше.
Вакцинация не защищает от всех видов ВПЧ. Поэтому всем женщинам в возрасте от 25 до 65 лет, даже если они вакцинированы, рекомендуется проводить регулярные осмотры через мазок.
Своевременное обнаружение и полное удаление кондилом снижает риск возникновения заболеваний. Эффективность использования презервативов для защиты от передачи инфекции может значительно снизить риск развития этого заболевания. Наиболее перспективным способом профилактики и лечения начальных стадий заболевания, вызванного этой инфекцией, является специфическая поливалентная вакцина.
Что такое вкр в медицине
Исследование используется для диагностики папиллома-вирусной инфекции, с одновременным определением количества вирусной ДНК в исследуемом материале. Анализ позволяет сделать вывод о степени поражения слизистой, оценить эффективность терапии в процессе лечения. Определяется суммарное количество ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16-го, 18-го и 45-го генотипов. Тест также позволяет оценить вероятность интеграции ВПЧ 16-го, 18-го и 45-го типа в геном человека (что является опасным и прогностически неблагоприятным фактором).
Папиллома-вирусы высокого канцерогенного риска, вирусы папилломы высокого канцерогенного риска, ВПЧ высокого канцерогенного риска.
Human Papillomavirus, DNA; HPV, Viral Load.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) представляют собой широко распространённую и вариабельную группу вирусов, поражающих эпителий кожи и слизистых оболочек и обладающих онкогенным потенциалом. ВПЧ передаётся при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду.
К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путём, курение и проживание в крупных городах.
Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.
ВПЧ может по-разному воздействовать на эпителий: способствовать возникновению доброкачественных образований (папиллом, кондилом) или объединению ДНК папиллома-вируса с геном клетки, что приводит к дисплазии (неоплазии) и в дальнейшем к раку (чаще всего в переходной зоне шейки матки).
К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68.
Для выявления возбудителя используется метод полимеразной цепной реакции, которая позволяет обнаружить ДНК вируса. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.
По данным исследований, количественное содержание вируса в материале коррелирует со степенью неоплазии: чем выше вирусная нагрузка, тем выраженнее цитологические изменения в эпителии. При обследовании необходимо учитывать генотип вируса, наличие и степень цитологических и гистологических изменений в тканях, увеличение или снижение вирусной нагрузки через несколько месяцев (6 месяцев и более) после предыдущего обследования.
В исследовании проводится определение суммарного количества ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16, 18 и 45 генотипов. ВПЧ ВКР являются главной этиологической причиной развития РШМ и предшествующей ему тяжелой дисплазии. ВПЧ обнаруживается в 95 % случаев РШМ, из них 16, 18, 45 генотипы в совокупности являются причиной 75 % плоскоклеточных раков и 94 % аденокарцином шейки матки.
Известно, что развитие РШМ часто ассоциировано с интеграцией ДНК вируса в геном клетки-хозяина. Наиболее часто интегрируют ВПЧ 16 и 18 генотипов, при этом происходит разрыв участка Е1/Е2 при сохранении онкогена Е6/Е7. В тест-системе, на которой выполняется данное исследование, по разным каналам прибора детектируются разные участки генома ВПЧ 16, 18 и 45 типов. Выявление области Е6 при отсутствии области Е1/Е2 позволяет косвенно судить о возможности интеграции вируса в геном человека. В случае обнаружения возможности интеграции вируса в геном в бланк ответа выводится соответствующая информация.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Уровень вирусной нагрузки интерпретируется с учетом результатов цитологического исследования мазков, гистологических изменений в биоптате и генотипа вируса, изменении его количества с течением времени.
Кто назначает исследование?