Что такое вакцинация и пролонгированная эксплуатация
Чем опасна вакцинация от коронавируса
Что известно о COVID-19?
Это РНК-содержащий вирус животного происхождения, относящийся к группе коронавирусов. Согласно данным ВОЗ, он передается от заболевшего человека через мелкие капли, которые выделяются при чихании и кашле из носа и рта. С момента заражения до появления первых симптомов проходит от 1 до 14 дней (в среднем – 7). Носитель вируса еще не знает о своей болезни, но в плане заражения уже представляет опасность для окружающих. По информации коронавирусной эпидемиологии, COVID-19 в 2-3 раза заразнее гриппа, но в 2-3 раза менее заразен, чем корь.
При легком течении болезни ее симптомы сходны с ОРВИ и заканчиваются выздоровлением через 14 дней без каких-либо дальнейших последствий. В тяжелых случаях COVID продолжается до 8 недель. Даже при отсутствии выраженных признаков заболевания у переболевших формируется иммунитет. Но учитывая, пусть и нечастые случаи повторного заражения, сохраняется он не слишком долго. Гораздо большим эффектом обладает вакцина.
Как действует вакцина?
Сегодня в мире используется несколько иммунопрепаратов, разработанных специалистами разных стран и прошедших необходимые клинические испытания. Все они предназначены для формирования иммунитета к возбудителю. После их введения иммунная система:
У человека, прошедшего вакцинацию, формируется стойкий иммунитет к COVID.
Опасна ли вакцинация?
Каждый человек реагирует на иммунопрепарат индивидуально. Поэтому даже самая качественная вакцина может вызвать побочные эффекты. Их появление на непродолжительное время – единственная опасность.
Чем опасна вакцинация от коронавируса:
Эти неприятные симптомы исчезают в течение нескольких дней.
Тяжелые состояния после введения иммунопрепарата могут развиваться у людей, имеющих противопоказания. Нельзя проводить вакцинацию, если наблюдаются:
При этих патологиях прививка может спровоцировать обострение.
Также противопоказанием является возраст (младше 18 и старше 65 лет), беременность, недавно перенесенная тяжелая форма коронавирусной инфекции. У переболевших людей в первое время после выздоровления отмечается высокий уровень антител, а вакцина повысит его еще больше. Последствия могут проявиться бурной иммунной реакцией в форме цитокинового шторма.
Как уменьшить негативные проявления?
Снизить развитие побочных явлений поможет соблюдение всех рекомендаций врача. Чтобы уменьшить риск развития негативных симптомов после вакцинации, нужно:
При отсутствии противопоказаний и соблюдении всех требований, риск побочных эффектов сводится к минимуму.
После прививки от коронавируса врачи советуют соблюдать щадящий режим и выпивать не менее 1,5 литров жидкости в день. При повышении температуры рекомендуется принять жаропонижающее средство. Если слабость не проходит в течение нескольких дней, появились аллергические реакции, нужно немедленно обратиться к доктору.
Когда будет массовая вакцинация?
Массовая вакцинация в США, Канаде и европейских странах началась еще в декабре прошлого года. В это же время стартовала она и в России. Но на начальном этапе мероприятие проводилось только для определенной категории лиц – молодых людей и тех, кто по роду своей профессиональной деятельности не может ограничить число контактов. Сегодня привиться от ковида можно в любом регионе страны.
Манипуляция: Искусственный интеллект признал использование вакцин эвтаназией
Следующий
Мажилис одобрил законопроект для развития социального предпринимательства
Автор
Ержан Кенесов
Поделиться статьей
Пользователи Казнета делятся видеороликом, в котором голосовому помощнику «Алисе» задают вопрос о том, что такое «пролонгированная эвтаназия». Искусственный интеллект находит ответ в социальной сети «ВКонтакте» и сообщает, что пролонгированная эвтаназия — это вакцинация. Это сообщение является манипуляцией, передает Toppress.kz со ссылкой на StopFake.kz.
На видео голосовой помощник читает популярный фейк о том, что «вакцинация – это пролонгированное убийство», распространившийся после высказывания фельдшера Марины Корнатовской. О том, что это утверждение ложное, мы уже рассказывали ранее.
Голосовой помощник не способен отвечать на вопросы пользователей самостоятельно. «Алиса» находит наиболее подходящие ответы в Сети, следуя заданному алгоритму. Таким образом, на запрос пользователя о погоде «Алиса» не делает прогноз самостоятельно, а лишь озвучивает найденный в интернете результат.
При этом источник информации выбирает тот, который больше других соответствует запросу. В данном случае, например, он цитирует пост в соцсети. Искусственный интеллект не берет в расчет авторитетность и достоверность озвученных данных.
Термин «пролонгированная эвтаназия» используется относительно недавно и исключительно противниками вакцинации. Поэтому встретить его в контексте, не имеющем отношения к иммунизации, невозможно.
В классическом понимании эвтаназия быть пролонгированной не может, так как по определению является «практикой прекращения жизни человека, страдающего неизлечимым заболеванием и испытывающего вследствие этого заболевания невыносимые страдания». То есть к ней прибегают исключительно для того, чтобы как можно быстрее прекратить мучения неизлечимо больного человека.
В классификации видов эвтаназии термина «пролонгированная» также нет.
Таким образом, расценивать ответ «Алисы» как истину в последней инстанции нельзя. Голосовой помощник лишь прочел пост пользователя социальной сети, который соответствовал запросу.
Теория о том, что вакцинация ведет к смерти, была многократно опровергнута и признана антинаучной.
Что такое вакцинация и для чего она нужна?
Вакцинация — практически единственный надёжный способ защиты от инфекции. Здоровый образ жизни, рациональное питание, безусловно, должны иметь место в жизни человека, поскольку обеспечивают нормальное функционирование всего организма. Но, к сожалению, эти факторы не могут гарантировать защиту от инфекций.
Вакцинация — это формирование адекватной реакции организма на инфекцию по естественному пути. Суть вакцинации сводится к введению ослабленных или убитых микробов для того, чтобы организм «запомнил» врага и при повторном попадании микроба был готов запустить защитные реакции с удвоенной силой. Благодаря прививкам можно подготовить организм к встрече с такими тяжёлыми заболеваниями, как гепатит, дифтерия, корь, коклюш, полиомиелит, свинка столбняк, туберкулёз и так далее. На сегодняшний день прививка — это стандартная профилактическая процедура, являющаяся полностью контролируемым процессом, реакция на которую известна врачам и вполне предсказуема.
Каждый регион, каждая страна имеет свой «Календарь прививок», куда входят так называемые обязательные прививки. Этот набор прививок зависит не только от того, насколько актуальны на данной территории те или иные инфекции, но и от финансовых возможностей государства.
Календарь представляет собой финансово подкреплённые обязательства правительства страны перед своим населением. Поэтому Календарь— это тот минимальный набор прививок, который считается обязательным для выполнения, и ответственные родители должны проследить за тем, чтобы они были сделаны ребёнку.
На бесплатную защиту от инфекций имеет право любой гражданин нашей страны.
Нужно отметить, что в нормативных актах, например, в приказе о Национальном календаре прививок, сказано, что вакцинация может быть проведена всеми вакцинами, которые зарегистрированы на территории Российской Федерации. Таким образом, пациент имеет право выбора: привиться бесплатно по месту жительства или выбрать вакцинацию в условиях коммерческого центра.
Зачастую в Календаре прививок прописана З-кратная вакцинация (например, от гепатита В, АКДС и пр.), и с этим набором ребёнок уходит во взрослую жизнь, в которой повторных прививок уже не требуется.
К сожалению, нельзя сказать, что человек, который привит, на 10094 защищён от инфекции, но он на 10094 защищён от серьёзных осложнений и летального исхода. Если даже он заболеет, заболевание будет протекать легко.
Нужно ли каким-то образом подготовить ребёнка перед вакцинацией?
Никакой особой подготовки большинству детей не требуется. Перед вакцинацией врач осматривает ребенка, измеряет его температуру и подробно расспрашивает маму на предмет наличия жалоб на его здоровье. Руководствуясь собранной информацией, доктор принимает решение о том, какую вакцину в данный момент необходимо ввести, есть ли у ребёнка противопоказания для вакцинации.
Родителям не стоит брать на себя функции врача, поскольку знаний, почерпнутых из Интернета, явно недостаточно, чтобы самостоятельно определить эффективность той или иной прививки, а тем более решить, нужна она ребёнку или нет. К сожалению, и педиатры не всегда имеют время, а порой и достаточной квалификации, чтобы доступно объяснить родителям, почему необходима вакцинация. Родители же, не имея достоверной информации, отказываются ставить своим детям прививки. Но тем самым они подвергают их огромному риску, поскольку при заносе какой-либо инфекции, например, полиомиелита, кори или коклюша, страдать будут в первую очередь непривитые дети.
Нужно ли давать ребёнку перед вакцинацией антигистаминный препарат?
Хотелось бы обратить особое внимание родителей на недопустимость самостоятельного применения антигистаминных препаратов перед вакцинацией. Антигистаминные и жаропонижающие препараты снижают эффективность вакцинации. Поэтому, если ребёнок не страдает тяжёлым хроническим заболеванием, и у него нет показаний к применению данных препаратов, «просто так» или «на всякий случай» давать ребёнку их не следует.
При возникновении какой-либо реакции (температура, местная реакция или, например, разжижение стула, которое бывает в ответ на введение полиомиелитной вакцины) доктор по факту назначит необходимый препарат, который будет наиболее эффективен в каждом конкретном случае.
Какие действия должны предпринять родители после вакцинации? Существуют ли какие-то ограничения?
Повторюсь, вакцинация — это вполне стандартная процедура, поэтому не следует укладывать ребенка в кровать и проявлять над ним «гиперопеку». Семья может жить своей обычной жизнью, но, конечно, помнить, что ребёнку была сделана прививка, и, может быть, чуть внимательнее отнестись к ребёнку.
При введении АКДС и других серьёзных вакцин в ближайшие З дня постарайтесь придерживаться более или менее щадящего режима для ребёнка, то есть желательно избегать лишних визитов, ограничить контакты и общую нагрузку на ребёнка. В это время малышу показан спокойный домашний режим. Прогулки не возбраняются. Постарайтесь лишь прикрыть место прививки одеждой, чтобы на него не попала грязь. И, конечно, прогулка должна быть разумной продолжительности.
Также рекомендуется не экспериментировать в питании, то есть не вводить новых продуктов в рацион ребёнка, в период за неделю до прививки и неделю после. Если ребёнок склонен к аллергическим реакциям, в этот период он должен получать питание, в котором исключены те продукты, которые могут вызвать аллергию.
Если ребёнку была сделана инъекция (а практически все вакцины являются инъекционными препаратами), постарайтесь не купать его в течение дня после прививки. На другой день можно принимать ванну в обычном режиме, опять же, если у ребёнка не будет температурной реакции.
После прививки от полиомиелита, которая капается в рот, в течение часа рекомендовано ограничение по питанию и питью, поскольку живая полиомиелитная вакцина может смыться со слизистых, и не дать ожидаемого эффекта, Данное ограничение не касается других вакцин, которые вводятся в виде инъекций.
Таким образом, как видите, рекомендации самые простые. Жёсткие ограничения вводятся в особых случаях, относящихся к вакцинации групп детей с тяжёлыми хроническими заболеваниями, выраженной аллергией и так далее.
Санитарными правилами закреплена рекомендация, касающаяся поствакцинального периода, согласно которой после прохождения прививки ребенку следует находиться в лечебном учреждении в течение 20—30 минут. Именно в этот временной отрезок наиболее вероятно первое проявление возможной аллергической реакции. Однако такие ситуации у детей, к счастью, бывают крайне редко. Родители, которых беспокоит состояние ребенка после прививки, всегда могут остаться и провести это время под контролем врача в лечебном учреждении. Если ребенок склонен к аллергической реакции, это условие нужно выполнить обязательно.
И последнее. Перед тем, как пойти на вакцинацию, дома на случай, если у ребёнка к вечеру поднимется температура, желательно иметь жаропонижающее средство. Для малышей до 1 года лучше взять свечи, для детей более старшего возраста подойдет таблетированный препарат или в виде сиропа. Порог, при котором нужно снижать температуру, у каждого ребёнка свой. Родители могут сами по состоянию ребенка определить, нужно ли давать ему жаропонижающее,
Что делать, если у ребёнка возникла реакция на прививку?
В случае возникновения реакции родителям следует позвонить в то учреждение, в котором они сделали прививку, и рассказать об этом. В идеале медработники в течение первого-второго дня должны сами позвонить и уточнить, есть ли у ребёнка реакция на прививку. Но если звонка нет, родителям нужно позвонить самим, так как доктор в любом случае должен знать, как ребёнок перенёс вакцинацию.
Где бы ребёнку ни сделали прививку (по закону каждый из нас имеет право выбирать лечебное учреждение, где он будет вакцинироваться), он ни в коем случае не лишается бесплатной медицинской помощи. И если ребёнку необходима медицинская помощь, достаточно вызвать педиатра по месту жительства. Однако прежде чем вызывать «скорую» или педиатра на дом, рекомендуется позвонить и обсудить ситуацию с врачом, который делал прививку. Бывают случаи, когда вполне стандартная ситуация видится родителям как угрожающая жизни ребёнка. В этом случае врач успокоит родителей и даст необходимые рекомендации.
Что такое прививочный сертификат?
Хотелось бы предостеречь родителей от самостоятельного приобретения вакцин в аптеке. Нужно понимать, что при хранении и продаже вакцин должны соблюдаться строгие требования. Если в лечебном учреждении вакцина хранится с соблюдением всех правил и норм, и эпидемиологи строго контролируют этот процесс, то в аптеке хранение никем не контролируется.
В аптеке должны соблюдаться те же правила, что и в лечебном учреждении, то есть должно быть специальное помещение, отдельный холодильник с термометром под хранение вакцин, в котором они должны быть расположены в определённом порядке, журнал регистрации температурного режима и так далее. За состоянием холодильника необходимо постоянно следить.
Кроме того, аптеки обязаны отпускать вакцины только по назначению врача — по рецепту, что указано в инструкции к любой вакцине.
Фармацевт при отпуске вакцины должен объяснить покупателю, как нужно правильно её хранить, в течение какого времени её нужно доставить до прививочного кабинета, а пациент должен, в свою очередь, дать расписку о том, что его проинструктировали.
Замечу, что вакцина должна быть доставлена по назначению в минимальные сроки и только в термосумке, желательно с термометром или специальным термоиндикатором, поскольку вакцина может храниться только при температуре +2+8 о с.
Без холодильника хранение допускается не более 10 минут. Это то время, которое можно использовать на перекладку вакцины из холодильника в термосумку. Хранить вакцину в домашнем бытовом холодильнике категорически запрещено! Жалобы родителей на то, что педиатры не берут вакцину, которую они принесли в руках, и отказываются вводить её ребёнку, по меньшей мере, не оправданы.
Что такое ДНК-вакцины и с чем их едят?
Автор
Редактор
ДНК-вакцины относятся к типу принципиально новых биологических препаратов. С их разработкой связывают большие надежды на повышение эффективности профилактики не только заболеваний бактериальной, вирусной и паразитарной природы, но и аллергических, аутоиммунных и даже онкологических болезней. Более двадцати лет назад возникла идея использовать гены возбудителей заболеваний для активации защитных механизмов. Конструкция ДНК-вакцин гениально проста: главные компоненты в ней — вектор и целевой иммуноген. Но, несмотря на это, ДНК-вакцины не стоят на страже нашего здоровья: их не вводят пациентам в поликлиниках, они не продаются в аптеках.
Более сотни лет прошло с введения Л. Пастером термина «вакцина» (лат. vacca — корова) и более двух сотен — с легендарных экспериментов Э. Дженнера по прививанию коровьей оспы ребенку с целью предупреждения развития опасного человеческого варианта болезни. Принцип защитного действия введенных в организм ослабленных инфекционных агентов или их частей научным языком объяснили уже в XX веке: безопасный чужеродный антиген учит иммунную систему в дальнейшем быстро распознавать и уничтожать активного и опасного возбудителя с точно такими же антигенами*. Процесс часто сравнивают с раздачей фоторобота преступника сотрудникам полиции.
* — Хронологию разработки вакцин, информацию о влиянии вакцинации на характер эпидемий и численность человечества, доводы адептов движения антивакцинации и ответы на множество животрепещущих вопросов относительно целесообразности, пользы и вреда прививок можно найти в статье «Вакцины в вопросах и ответах» [1]. — Ред.
За 200 лет форма и содержание прививок претерпели существенные изменения: Дженнер инфицировал царапины содержимым оспинных пустул, Пастер облагородил процедуру, вводя ослабленных агентов шприцем, затем научились создавать вакцины из убитых и даже растерзанных возбудителей (сплит- и субъединичные вакцины), недавно начали использовать рекомбинантные вакцины, содержащие один или несколько антигенов (обычно белковых), синтезированных генно-инженерным путем. И вот в двери ВОЗ робко стучится новый плод, порожденный слиянием науки с фарминдустрией, — вакцина из нуклеиновых кислот [2].
Начало ДНК-вакцинологии связывают с работами Д. Танга (1992 г.), в которых была показана способность плазмидной ДНК, экспрессирующей гормон роста человека, индуцировать выработку антител.
В классическом варианте такие вакцины состоят из плазмидных ДНК, содержащих гены возбудителей инфекционных заболеваний (целевые гены, или иммуногены). Продукты данных генов способны вызывать развитие защитных реакций организма, выступая в этом случае в роли антигенов. Доставку ДНК в макроорганизм первоначально осуществляли в комплексе с катионными липидами, однако эффект от введения препарата чистой нуклеиновой кислоты оказался более выраженным. Введенная в организм ДНК проникает в клеточное ядро, превращая клетку в завод по производству вакцины. Такая ДНК длительное время существует вне хромосом без репликации, транскрибируется за счет ферментов хозяйской клетки и экспрессирует соответствующие гены, продукты которых вызывают формирование иммунитета (рис. 1).
Рисунок 1. Схематическое изображение процессов в клетке после проникновения ДНК-вакцины. Рисунок из «Википедии».
ДНК-вакцины сохраняются в организме 3–4 недели. За это время они успевают индуцировать Т- и В-клеточный иммунитет (рис. 2). Однако, несмотря на кажущуюся простоту, многие механизмы развития иммунного ответа на ДНК-вакцины остаются малоизученными [3].
Рисунок 2. Схема развития иммунного ответа на ДНК-вакцину. Рисунок из «Википедии».
Более чем 20-летняя эволюция ДНК-вакцин продолжается и сегодня. Прогресс в дизайне кодирующих антигены нуклеотидных последовательностей, в оптимизации состава (в том числе включение молекулярных адъювантов), в совершенствовании форм и физических методов доставки позволил второму поколению ДНК-вакцин преодолеть такие проблемы первого поколения, как низкий уровень трансфекции и недостаточная иммуногенность.
Сейчас разработки в области генетических вакцин проводятся во многих странах мира. В настоящее время сконструированы экспериментальные ДНК-вакцины для профилактики инфекционных заболеваний паразитарной (шистосомоз, лейшманиоз), бактериальной (хламидиоз, сибирская язва, микоплазмозы) и вирусной (бешенство, лихорадки Западного Нила и Эбола) природы. На разных стадиях доклинических и клинических испытаний находятся генетические вакцины против вирусов гриппа, гепатитов А и В, герпеса, кори, геморрагических лихорадок, ВИЧ, собачьей чумы, ящура, папилломавирусов, цитомегаловирусов. Столь интенсивное развитие данного направления вакцинологии, вероятно, уже в ближайшей перспективе обеспечит реальный выход в виде эффективных и безопасных вакцинных препаратов, рекомендованных для применения в здравоохранении и ветеринарии.
Чем же ДНК-вакцины хороши?
Но. всё хорошее имеет свои недостатки
Конструкция ДНК-вакцин
Для получения ДНК-вакцин ген, кодирующий продукцию иммуногенного белка, необходимо встроить в вектор, роль которого выполняют бактериальная плазмида или вирус [4]. Вектор не должен реплицироваться в клетках макроорганизма, поэтому может содержать только прокариотические сайты инициации репликации.
Для создания ДНК-вакцин используются хорошо изученные плазмиды грамотрицательных бактерий (в основном E. coli), в частности многокопийная pUC19 или pBR322 и их производные. Разработаны специальные векторы для ДНК-вакцин — pcDNA3 и pcDNA3.1 (Invitrogen), которые содержат цитомегаловирусный (ЦМВ) промотор и сигнал полиаденилирования гена гормона роста быка. Также к коммерчески доступным плазмидам, которые чаще всего используются в качестве векторов для ДНК-вакцин, относятся: pVAX1 (Invitrogen), pCI, VR1012 DNA, pJW4303, pVAC1-mcs и pVAC2-mcs (InvivoGen). Последние две применяются для усиления гуморального иммунного ответа и содержат антигены к поверхностным структурам мышечных клеток [5].
Из числа вирусных векторов, обеспечивающих более высокий уровень экспрессии целевого антигена, чаще всего используются: дефектный по репликации аденовирус серотипа 5 (AD5), ортопоксвирусы и модифицированные вирусы осповакцины, альфавирусы. Аденовирусный вектор обладает высокой эффективностью трансфекции — до 100 %, в него можно включать до 8 т.п.н. ДНК. Отрицательный момент — синтез собственных белков, способных индуцировать иммунный ответ. Самые используемые осповакцинные модификации — Ankara (MVA) и New York Vaccinia strain (NYVAC). Первая получена в результате 56-кратного пассирования вируса в куриных эмбриональных фибробластах. В геноме NYVAC удалено 18 открытых рамок считывания, ассоциированных с диапазоном хозяев и вирулентностью. В каждый из перечисленных векторов можно встроить до 50 т.п.н. ДНК [6].
Элементы конструктора
Рисунок 3. Конструкция ДНК-вакцины на основе вектора pVAX1 с химерным геном (Rat cDNA, Human cDNA). Pcmv — цитомегаловирусный промотор; MCS — сайт для множественного клонирования генов; BGH pA — терминатор с сигналом полиаденилирования гена гормона роста быка; Kanamycin — ген устойчивости к канамицину; pUC ori — участок начала репликации плазмид группы pUC; HindIII, BstEII, XbaI — сайты рестрикции. Рисунок из [5].
Чтобы пригодиться для создания ДНК-вакцин, каждый уважающий себя вектор должен содержать необходимые конструкционные элементы (рис. 3).
Службы доставки
Способам введения ДНК-вакцин в организм уделяется не меньше внимания, чем созданию самих конструкций, так как от этого зависит успех иммунизации в целом. Поэтому разработаны различные, порой весьма хитроумные, методы доставки таких вакцин в организм.
Самый простой — это парентеральный способ введения, который заключается в инъекции ДНК-вакцин в солевом растворе (внутримышечно, внутрикожно). При этом бόльшая часть ДНК поступает в межклеточное пространство и только потом включается в клетки.
Использование генного пистолета. Для этого ДНК фиксируют на микроскопических золотых гранулах (около 1–2 мкм), а затем с помощью устройства, приводимого в действие сжатым гелием, гранулы «выстреливают» непосредственно внутрь клеток (рис. 4). Для данного способа доставки требуется значительно меньшее количество вводимого материала, чем для внутримышечной инъекции. Так, для инъекции мышам нужно 10-100 мкг препарата, а с использованием генного пистолета достаточно 0,1-1 мкг.
Электропорация — техника, которая с использованием электрических импульсов позволяет формировать поры в клеточной мембране и доставлять ДНК непосредственно в клетки.
Микроконтейнеры из полиматериалов. Московские ученые, например, создали пористую микросферу из карбоната кальция, покрытую несколькими слоями полисахаридов, в которую упаковывается молекула ДНК. Если микросферы в полимерной оболочке поместить в подкисленный раствор, карбонат кальция внутри растворится и уйдет через полимерную мембрану. Внутри останется только ДНК, подлежащая транспортировке. Подобных микроконтейнеров для доставки ДНК разработано не так много. Есть зарубежные аналоги, в которых оболочка капсулы выполнена из полимолочной кислоты. На их основе создают вакцины против гепатита и даже СПИДа. Средний диаметр микрокапсул для доставки ДНК-вакцин всего 1–2 микрона. Такие микрокапсулы можно ввести подкожно или даже в кровь. Если в микрочастицу вместе с ДНК или лекарством поместить фермент, расщепляющий оболочку капсулы изнутри, то высвобождением лекарства можно управлять: чем меньше фермента, тем медленнее рушится оболочка.
Липосомные носители обеспечивают высокую эффективность доставки при внутривенном введении, при этом экспрессия целевых генов значительно возрастает, так как осуществляется во многих органах, и особенно в селезенке.
ДНК-вакцины можно вводить перорально с использованием бактериальных носителей. Для этих целей применяются, например, модифицированные бактерии Shigella flexneri с делецией в гене asd. Мутантные бактерии растут in vitro на среде с диаминопимелиновой кислотой и, проникая в эукариотические клетки, не размножаются в них, так как отсутствует упомянутая кислота, а продуцируют закодированные в плазмиде антигены [6]. Для перорального введения создан вектор на основе ослабленного штамма Salmonella, который способен к самоуничтожению в организме через определенный период времени после выполнения иммунизационных задач. Для этого бактерию модифицировали таким образом, что ее выживание стало зависеть от наличия искусственных сахаров, не встречающихся в условиях организма. После того как в клетках, зараженных генно-инженерным штаммом Salmonella, заканчивается запас специфического сахара, поставляемого вместе с вакциной, бактерии не способны сохранить целостность своих клеточных стенок, что приводит к их гибели [11].
Была предложена оригинальная система доставки ДНК с помощью «теней» — неживых клеток грамотрицательных бактерий, лишенных цитоплазматического содержимого, но сохраняющих морфологию и антигенные структуры, включая адгезивные факторы. «Тени» обладают тропностью к антигенпрезентирующим клеткам макроорганизма и адъювантными свойствами, усиливающими иммунный ответ. Кроме того, в лиофильно-высушенном состоянии препараты «теней» хранятся при комнатной температуре неопределенно долгое время, а их производство дешево [6].
Разработана технология доставки ДНК-вакцин с использованием бактериофагов [12]. В данном случае вакцинная ДНК встраивается в геном вектора-бактериофага, которым затем иммунизируют макроорганизм [13].
Нужно учитывать, что разные методы доставки ДНК-вакцин в организм обеспечивают развитие различных клеточных реакций, при этом важные иммунологические пути могут быть стимулированы или, наоборот, не задействованы в ходе развития защитного ответа. Способы и места введения ДНК-вакцин варьируют для разных видов организмов. Например, уши свиньи — отличное место для инъекций, а вот введение препарата в уши овец или коров неэффективно.
Помощники генетических вакцин
Для усиления иммунного ответа, вызванного ДНК-вакцинами, совместно с ними вводят различные адъюванты, например, плазмиды, кодирующие синтез цитокинов, гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора и других костимуляторных молекул (B7.1 (CD80), B7.2 (CD86) и CD40) [14].
Для ДНК-вакцины против ВИЧ создана конструкция, которая обеспечивает получение более высокого титра антител и его сохранность в течение более длительного времени по сравнению с обычной ДНК-вакциной. Эта молекулярная вирусоподобная конструкция представляет собой частицы диаметром 25-30 нм, содержащие в центре полинуклеотидный комплекс — рекомбинантную плазмиду pGEX-2T-TBI с генами инфекционного агента ВИЧ-1 или двухцепочечную РНК, которая является стимулятором неспецифической резистентности организма. На поверхности конструкции располагаются гибридные белки, содержащие эпитопы ВИЧ-1 и фермент (например, глутатион-S-трансферазу или галактозидазу). Связь между полинуклеотидным комплексом и гибридными белками осуществляется посредством конъюгата: спермидин (для связи конъюгата с полинуклеотидным комплексом) — полиглюкин — субстрат для фермента (например, глутатион или галактопиранозид; для аффинной сорбции гибридных белков на конструкцию).
Современное состояние ДНК-вакцинологии
В настоящее время в разработке находится около 420 ДНК-вакцин против заболеваний различной этиологии как человека, так и животных.
Бόльшая часть разрабатываемых противоинфекционных терапевтических ДНК-вакцин нацелена на ВИЧ-1. Существенные успехи достигнуты в активной иммунизации против вируса папилломы человека. Некоторые вакцины находятся на стадии клинических испытаний и, возможно, в скором времени будут введены в обязательную практику. Так, американская компания Inovio, специализирующаяся на разработке ДНК-вакцин, создала препарат против цервикальной дисплазии VGX-3100, который проходит вторую фазу клинических испытаний. В 2013 г. VGX-3100 удостоилась награды «Лучшая терапевтическая вакцина» на Всемирном конгрессе по вакцинам. В I или IIа фазах клинических испытаний находятся: вакцины против гепатита С, цервикального рака, рака головы и шеи, СПИДа, гриппа. Компанией Inovio также ведется активная разработка вакцин против лихорадки Эбола* и рака простаты.
* — О более привычном, но не менее перспективном методе борьбы с вирусом Эбола — с помощью «коктейля» из моноклональных антител — читайте в статье «Вирус Эбола и макак-резус: получено новое эффективное лекарство» [15]. — Ред.
Разработке способов вакцинотерапии онкологических заболеваний при помощи рекомбинантных ДНК большое внимание уделяют и другие организации. Хорошую эффективность показала ДНК-вакцина против лейкемии, созданная в Саутгемптонском университете (но вводимая с помощью электропоратора всё той же Inovio). Вакцина направлена на подавление в организме активности гена WT1 (Wilms tumor gene). Именно повышенная активность этого гена отмечается в опухолевых клетках различных видов. В ходе I фазы клинических испытаний у пациентов наблюдалось развитие иммунного ответа, в том числе активация Т-киллеров и выработка антител; была также доказана безопасность новой вакцины. Испытания перешли в фазу II, однако из-за проблем с финансированием организаторы пока не могут увеличить число участников [16].
Животные нуждаются в такой же защите, как и люди. В связи с этим для ветеринарии разрабатываются ДНК-вакцины против бычьего и лошадиного герпесвирусов, собачьего вируса чумы, вируса классической свиной лихорадки, кроличьей папилломы, ящура, вируса инфекционного гемопоэтического некроза, вируса гриппа, вируса японского энцефалита, вируса бешенства, вируса везикулярного стоматита и т.д. [13]. Много ДНК-вакцин создается для борьбы с вирусными, бактериальными и эукариотическими патогенами рыб [17].
Активно разрабатываются ДНК-вакцины для повышения иммунитета птиц. Многокомпонентные ДНК-вакцины могут сократить количество прививок, необходимых во время короткой жизни птиц и позволят избежать риска увеличения вирулентности некоторых патогенов. В случае птицеводства проблема связана с тем, что вакцины вводятся в амниотическую жидкость яиц, которая обладает ДНКазной активностью, поэтому свойства ДНК-вакцины могут ухудшиться. Заключение ДНК в катионные липосомы, скорее всего, поможет решить эту проблему.
Из множества разработанных ДНК-вакцин на сегодняшний день лицензировано всего несколько, причем повезло в этом плане только животным (табл. 1).