Что такое биуретовая реакция
Биуретовая реакция
Биуретовая реакция — качественная на все без исключения белки, а также продукты их неполного гидролиза, которые содержат не менее двух пептидных связей. Биуретовая реакция обусловлена присутствием в белках пептидных связей, которые в щелочной среде образуют с сульфатом меди (ІІ) окрашенные медные солеобразные комплексы. Биуретовую реакцию дают также некоторые небелковые вещества, например биурет (NH2-CO-NH-CO-NH2), оксамид (NH2CO-CO-NH2), ряд аминокислот (гистидин, серин, треонин, аспарагин).
Проведение
К 1 мл исследуемого раствора доливают 1 мл 10 % раствора гидроксида натрия (NaOH) и 2-3 капли 1 % раствора сульфата меди (CuSO4). При положительной реакции появляется фиолетовая окраска с красным либо синим оттенком.
Полезное
Смотреть что такое «Биуретовая реакция» в других словарях:
БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ, одна из наиболее характерных цветных реакций, к рую дают белки и высшие продукты их расщепления. К испытуемому раствору прибавляется треть объема крепкой натронной щелочи и небольшое количество сильно разведенного (1:500 или… … Большая медицинская энциклопедия
биуретовая реакция — biureto reakcija statusas T sritis chemija apibrėžtis Baltymų ir peptidų nustatymo reakcija. atitikmenys: angl. biuret reaction rus. биуретовая реакция … Chemijos terminų aiškinamasis žodynas
биуретовая реакция — метод качественного и количественного определения белков и продуктов их частичного гидролиза в крови, моче и других жидкостях, заключающийся в обнаружении и колориметрии фиолетового или красного окрашивания, появляющегося при добавлении к… … Большой медицинский словарь
БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — цветная р ция на биурет, к рую осуществляют, прибавляя к щелочному р ру последнего разб. водный р р соли Сu2+ (обычно CuSO4). При этом р р окрашивается в интенсивный фиолетовый цвет благодаря образованию комплексного соед. (ф ла I, М + катион… … Химическая энциклопедия
БЕЛКИ — БЕЛКИ, или протеины, высокомолекулярные коллоидальные органические вещества, построенные из остатков аминокислот. Б. по своему количественному содержанию в организме животных занимают среди твердых составных частей его одно из первых мест, а по… … Большая медицинская энциклопедия
Белки — I Белки (протеины) органические соединения, структурной основой которых служит полипептидная цепь, состоящая из аминокислотных остатков, соединенных пептидными связями ( СО NH2 ) в определенной последовательности. Белки являются главными… … Медицинская энциклопедия
Туберкулин — или так назыв. лимфа Коха в 1890 г. Robert ом Koch ом был предложен как диагностическое и терапевтическое средство при туберкулезе и встречен с небывалым энтузиазмом не только со стороны публики и ближайших сотрудников Коха, но и с большим… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Биурет — органическое соединение состава С2H5N3О2 + Н2О или, подробнее, CO (NH2)(NH CONH2), амид аллофановой кислоты (см. это сл.); открыт в 1847 г. Видеманом при нагревании мочевины до 150° 170°; реакция ведется на масляной бане до тех пор, пока взятая… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Биурет — Биурет … Википедия
Что такое биуретовая реакция
Биуретовая реакция
Биуретовая реакция служит для обнаружения пептидных связей. Пептидная связь наиболее характерна для белков, и в этом смысле биуретовая реакция являемся наиболее специфичной. В белках возможны и другие связи, например, сульфидная, эфирная, солевая, водородная. Для обнаружения этих связей биуретовая реакция негодна.
Биуретовая реакция основана на том, что в щелочной среде (в присутствии гидроокиси натрия) при добавлении солей меди (медного купороса) полипептиды и белки образуют окрашенные комплексные соединения с ионом меди.
Хотя отдельные аминокислоты этой реакции не дают, но, как исключение, она возникает в присутствии аспарагина и гистидина.
Отрицательной чертой биуретовой реакции является то, что она малочувствительна. Окрашивание особенно хорошо проявляется только там, где белков много (например, в меристематических клетках).
Проведение биуретовой реакции на свежем материале может дать ослабленное окрашивание из-за слабой проницаемости тканей. Фиксированный материал дает в этом отношении лучшие результаты; однако надо иметь в виду, что фиксация спиртом неприемлема для спирторастворимых белков (как, например, белки зерновых злаков).
1) 7%-ный раствор медного купороса.
2) 30-50%-ный раствор гидроокиси натрия (или калия).
1. Погрузить срез в раствор медного купороса на 5-30 мин в часовом стекле.
2. Тщательно отсосать этот раствор фильтровальной бумагой и промыть срез водой до удаления голубой окраски из промывной воды.
3. Перенести срез на предметное стекло и обработать раствором гидроокиси натрия (или калия) от 10-20 мин до 1 ч.
4. Наблюдать появление фиолетовой окраски (иногда розовой в присутствии низкомолекулярных белков или полипептидов).
Результаты реакции (табл. 17)
Реакция не идет в паренхиме листа капусты и проявляется неярко в тканях пучка.
Эндосперм зерновки кукурузы не дает реакции, не считая алейронового слоя, где она проявляется, хотя и очень незначительно. Зародыш окрашивается ярко.
Биуретовая реакция
Смотреть что такое «Биуретовая реакция» в других словарях:
Биуретовая реакция — Биуретовая реакция качественная на все без исключения белки, а также продукты их неполного гидролиза, которые содержат не менее двух пептидных связей. Биуретовая реакция обусловлена присутствием в белках пептидных связей, которые в щелочной … Википедия
БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ, одна из наиболее характерных цветных реакций, к рую дают белки и высшие продукты их расщепления. К испытуемому раствору прибавляется треть объема крепкой натронной щелочи и небольшое количество сильно разведенного (1:500 или… … Большая медицинская энциклопедия
биуретовая реакция — biureto reakcija statusas T sritis chemija apibrėžtis Baltymų ir peptidų nustatymo reakcija. atitikmenys: angl. biuret reaction rus. биуретовая реакция … Chemijos terminų aiškinamasis žodynas
биуретовая реакция — метод качественного и количественного определения белков и продуктов их частичного гидролиза в крови, моче и других жидкостях, заключающийся в обнаружении и колориметрии фиолетового или красного окрашивания, появляющегося при добавлении к… … Большой медицинский словарь
БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — цветная р ция на биурет, к рую осуществляют, прибавляя к щелочному р ру последнего разб. водный р р соли Сu2+ (обычно CuSO4). При этом р р окрашивается в интенсивный фиолетовый цвет благодаря образованию комплексного соед. (ф ла I, М + катион… … Химическая энциклопедия
БЕЛКИ — БЕЛКИ, или протеины, высокомолекулярные коллоидальные органические вещества, построенные из остатков аминокислот. Б. по своему количественному содержанию в организме животных занимают среди твердых составных частей его одно из первых мест, а по… … Большая медицинская энциклопедия
Белки — I Белки (протеины) органические соединения, структурной основой которых служит полипептидная цепь, состоящая из аминокислотных остатков, соединенных пептидными связями ( СО NH2 ) в определенной последовательности. Белки являются главными… … Медицинская энциклопедия
Туберкулин — или так назыв. лимфа Коха в 1890 г. Robert ом Koch ом был предложен как диагностическое и терапевтическое средство при туберкулезе и встречен с небывалым энтузиазмом не только со стороны публики и ближайших сотрудников Коха, но и с большим… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Биурет — органическое соединение состава С2H5N3О2 + Н2О или, подробнее, CO (NH2)(NH CONH2), амид аллофановой кислоты (см. это сл.); открыт в 1847 г. Видеманом при нагревании мочевины до 150° 170°; реакция ведется на масляной бане до тех пор, пока взятая… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Биурет — Биурет … Википедия
Биуретовая реакция
Смотреть что такое «Биуретовая реакция» в других словарях:
Биуретовая реакция — Биуретовая реакция качественная на все без исключения белки, а также продукты их неполного гидролиза, которые содержат не менее двух пептидных связей. Биуретовая реакция обусловлена присутствием в белках пептидных связей, которые в щелочной … Википедия
БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ, одна из наиболее характерных цветных реакций, к рую дают белки и высшие продукты их расщепления. К испытуемому раствору прибавляется треть объема крепкой натронной щелочи и небольшое количество сильно разведенного (1:500 или… … Большая медицинская энциклопедия
биуретовая реакция — biureto reakcija statusas T sritis chemija apibrėžtis Baltymų ir peptidų nustatymo reakcija. atitikmenys: angl. biuret reaction rus. биуретовая реакция … Chemijos terminų aiškinamasis žodynas
биуретовая реакция — метод качественного и количественного определения белков и продуктов их частичного гидролиза в крови, моче и других жидкостях, заключающийся в обнаружении и колориметрии фиолетового или красного окрашивания, появляющегося при добавлении к… … Большой медицинский словарь
БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — цветная р ция на биурет, к рую осуществляют, прибавляя к щелочному р ру последнего разб. водный р р соли Сu2+ (обычно CuSO4). При этом р р окрашивается в интенсивный фиолетовый цвет благодаря образованию комплексного соед. (ф ла I, М + катион… … Химическая энциклопедия
БЕЛКИ — БЕЛКИ, или протеины, высокомолекулярные коллоидальные органические вещества, построенные из остатков аминокислот. Б. по своему количественному содержанию в организме животных занимают среди твердых составных частей его одно из первых мест, а по… … Большая медицинская энциклопедия
Белки — I Белки (протеины) органические соединения, структурной основой которых служит полипептидная цепь, состоящая из аминокислотных остатков, соединенных пептидными связями ( СО NH2 ) в определенной последовательности. Белки являются главными… … Медицинская энциклопедия
Туберкулин — или так назыв. лимфа Коха в 1890 г. Robert ом Koch ом был предложен как диагностическое и терапевтическое средство при туберкулезе и встречен с небывалым энтузиазмом не только со стороны публики и ближайших сотрудников Коха, но и с большим… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Биурет — органическое соединение состава С2H5N3О2 + Н2О или, подробнее, CO (NH2)(NH CONH2), амид аллофановой кислоты (см. это сл.); открыт в 1847 г. Видеманом при нагревании мочевины до 150° 170°; реакция ведется на масляной бане до тех пор, пока взятая… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Биурет — Биурет … Википедия
ЦВЕТНЫЕ И ИМЕННЫЕ КАЧЕСТВЕННЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛКИ
История химии в школьном курсе
РЕАКЦИЯ ПИОТРОВСКОГО (БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ)
В белках аминокислоты связаны друг с другом по типу полипептидов и дикетопиперазинов. Образование полипептидов из аминокислот происходит путем отщепления молекулы воды от аминогруппы одной молекулы аминокислоты и карбоксильной группы другой молекулы:
Образующаяся группа –С(О)–NН– называется пептидной группой, связь С–N, соединяющая остатки млекул аминокислот, – пептидной связью.
При взаимодействии дипептида с новой молекулой аминокислоты получается трипептид и т. д.
Дикетопиперазины образуются при взаимодействии двух молекул аминокислот с отщеплением двух молекул воды:
Дикетопиперазины были выделены из белков Н.Д.Зелинским и В.С.Садиковым в 1923 г.
Наличие в белке повторяющихся пептидных групп подтверждается тем, что белки дают фиолетовое окрашивание при действии небольшого количества раствора медного купороса в присутствии щелочи (биуретовая реакция).
Реакция идет по схеме:
Это реакция на цистеин и цистин. При щелочном гидролизе «слабосвязанная сера» в цистеине и цистине достаточно легко отщепляется, в результате чего образуется сероводород, который, реагируя со щелочью, дает сульфиды натрия или калия. При добавлении ацетата свинца(II) образуется осадок сульфида свинца(II) серо-черного цвета.
Описание опыта. В пробирку наливают 1 мл раствора цистина, прибавляют 0,5 мл 20%-го раствора гидроксида натрия. Смесь нагревают до кипения, а затем добавляют 0,5 мл раствора ацетата свинца(II). Наблюдается выпадение серо-черного осадка сульфида свинца(II):
Описание опыта. В пробирку наливают 5 капель 1%-го раствора глицина и прибавляют 1 каплю индикатора метилового красного. Раствор окрашивается в желтый цвет (нейтральная среда). К полученной смеси добавляют равный объем 40%-го раствора формальдегида (формалин). Появляется красное окрашивание (кислая среда):
Это реакция на аминокислоту глицин.
В таких солях ион меди координационными связями соединен с аминогруппами.
Описание опыта. В пробирку наливают 3 мл 3%-го раствора сульфата меди(II), добавляют несколько капель 10%-го раствора гидроксида натрия до образования голубого осадка. К полученному осадку гидроксида меди(II) приливают 0,5 мл концентрированного раствора глицина. При этом образуется темно-синий раствор глицината меди:
Описание опыта. В пробирку наливают 1 мл раствора тирозина и добавляют 0,5 мл концентрированной азотной кислоты. Смесь нагревают до появления желтой окраски. После охлаждения добавляют 1–2 мл 20%-го раствора гидроксида натрия до появления оранжевой окраски раствора:
Описание опыта. В пробирку наливают около
0,5 мл раствора уксуснокислого свинца и прибавляют раствор едкого кали до растворения образовавшегося осадка гидроксида свинца. В другую пробирку наливают
Триптофан, реагируя в кислой среде с альдегидами, образует окрашенные продукты конденсации. Например, с глиоксиловой кислотой (являющейся примесью к концентрированной уксусной кислоте) реакция протекает по уравнению:
По аналогичной схеме протекает и реакция триптофана с формальдегидом.
В ходе проведенного исследования мы выявили по литературным источникам имеющуюся информацию о цветных качественных реакциях на белковые аминокислоты; выполнили ряд перечисленных реакций и составили базу данных. Эта база может быть использована в школьной практике как в теоретическом плане, так и в практическом, т. к. мы приводим краткие, но подробные описания выполнения всех опытов.
Из предложенных 18 качественных реакций каждая практически осуществима в школьном курсе химии и имеет важное практическое значение. Сопровождение реакций химическими уравнениями конкретизирует и углубляет знания по биологической и органической химии, особенно знания учащихся специализированных биологических и химических классов.
Использованная литература
Ермаков А.Н., Арасимович В.В., Смирнова-Иконникова М.И., Мирри И.К. Методы биохимического исследования растений. М.,1952, 520 с.
Полянская А.С., Шевелева А.О. Методическая разработка по лабораторным работам: «Аминокислоты» и «Белки». Л., 1976, 37 с.
Пустовалова Л.М. Практикум по биохимии. 1999, 541 с.
Руководство к практическим занятиям по органической химии. Под ред. В.М.Родионова. М., 1954, 111 с.
Соловьев Н.А. Лабораторные работы по биологической химии. Методическая разработка. СПб., 1996, 70 с.
Филиппович Ю.Б., Егорова Т.А., Севастьянова Г.А. Практикум по общей биохимии. М., 1982, 311 с.
З.Саитов, С.В.Телешов, Б.Харитонцев,
секция «Юный химик» РХО им. Д.И.Менделеева (г. Тобольск)